Главная страница
qrcode

Краткий курс


НазваниеКраткий курс
АнкорMetoda po mikre.doc
Дата30.11.2017
Размер0.68 Mb.
Формат файлаdoc
Имя файлаMetoda_po_mikre.doc
ТипДокументы
#28898
страница9 из 15
Каталогryazmeduniver

С этим файлом связано 83 файл(ов). Среди них: raspisanie_-_osen.pdf, Научно-практический семинар.doc, телесно-ориентированная.doc, Разрешение на прохождение практики (NB снизу пе...docx, 20 частых вопросов первокурсника.doc, Osen_1_lech_2012-2013_nov_plan_-36_gr.doc, коллок по шизе.doc, 1 марта в 17.docx и ещё 73 файл(а).
Показать все связанные файлы
1   ...   5   6   7   8   9   10   11   12   ...   15

Диагностические препараты

Для текущей и ретроспективной диагностики инфекционных и неинфекционных заболеваний создано несколько сотен диагностических иммунобиологических препаратов. Помимо инфек­ционных болезней с их помощью диагностируют пищевые, профессиональные и другие виды ал­лергий; локализацию злокачественных опухолей (рак печени, лёгких, прямой кишки и др.); иммунные взаимоотношения матери и плода, беременность; совместимость органов и тканей при пересадках; иммунодефицитные состояния. Кроме того, диагностические препараты необхо­димы для проведения иммуноэпидемиологического анализа (выявление источников инфекции, размеры очагов инфекции, прогноз заболеваемости, определение иммунологической эффективно­сти вакцинации и др.). К диагностическим препаратам относятся: диагностические иммунные сы­воротки и иммуноглобулины, моноклональные антитела, диагностикумы (антигены), аллергены, диагностические бактериофаги, токсины, а также диагностические тест-системы. Чувствитель­ность и специфичность диагностических препаратов, основанных па иммунологических реакциях (реакция антиген-антитело, клеточные реакции), как правило, выше, чем других методов диагно­стики. Чувствительность характеризуется минимальным количеством антигенов или антител, ко­торое выявляет данная реакция. Под специфичностью понимают способность антигенов реагиро­вать только с гомологичными антителами. Применение моноклональных антител и очищенных антигенов еще более повышает специфичность диагностических препаратов.

Диагностические иммунные сыворотки и иммуноглобулины

(антимикробные, антитоксические, антиглобулиновые, антитканевые) в качестве антительных препаратов предназначены для выявления соответствующих антигенов в реакциях иммунитета. Для их получения данными антигенами проводят гипериммунизацию животных (кроликов, бара­нов, ослов), в крови у которых накапливаются соответствующие антитела. С помощью иммунных сывороток и иммуноглобулинов определяют вид, серовар бактерий или их экзотоксина, тип и подтип вирусов, видовую принадлежность антигенов и проч. Различают сыворотки агглютини­рующие, лизирующие, преципитирующие, люминесцирующие.

Сывороточные препараты перед выпуском контролируют па чувствительность, специфичность и титр в той реакции, для которой они предназначены. Титром называют максимальное разведение сыворотки (для преципитирующих сывороток - максимальное разведение антигена), с которым отмечается положительная реакция. На практике специфичной считают реакцию, протекающую в титре или половине тифа сыворотки. Для повышения специфичности некоторые сыворотки подвергают адсорбции по методу Кастеллани. Например, для удаления из антимикробной агглютинирующей сыворотки групповых антител к ней добавляют микробные взвеси родственных бактерий, на которых эти антитела адсорбируются; после удаления иммунных комплексов в адсорбированной сыворотке сохраняются типоспецифические антитела. Сыворотки, в которых после адсорбции остаются антитела к одному антигену, называют монорецепторными. Агглютинирующие адсорбированные сыворотки, как правило, применяют в реакции на стекле, не-адсорбированные - после серийных разведений в пробирках.

Активность антитоксических сывороток выражают в ЕА/мл (антитоксических единицах, т.е. по способности нейтрализовать определенное число доз соответствующего экзотоксина).

Примеры описания.

Сыворотка холерная Огава адсорбированная - диагностическая антимикробная агглютинирующая сыворотка, содержащая антитела к холерным вибрионам серовара Огава; полученная путём гипериммунизации лабораторных животных соответствующим микробным антигеном с по­следующей адсорбцией групповых антител; применяется в реакции агглютинации па стекле для идентификации холерных вибрионов Огава по антигенной структуре. Протовосибиреязвенная сы­воротка, меченная ФИТЦ - диагностическая антимикробная сыворотка (глобулиновая фракция), содержит антитела к Bacillus anthracis соединённые с флюорохромом (ФИТЦ); получена путем гипериммунизации лабораторных животных сибиреязвенными палочками с последующей конъю­гацией антител с красителем; используется в рабочем разведении для быстрого обнаружения воз­будителя сибирской язвы в материале прямым методом ИФ.

Гемолитическая сыворотка кроличья титр 1:1200 - диагностическая антитканевая гемолитическая сыворотка, содержит антитела, способные в присутствии комплемента визировать бара­ньи эритроциты; получают путем гипериммунизации кроликов бараньими эритроцитами; исполь­зуют в разведении 1:400 для титрования комплемента в реакции гемолиза и в составе гемолитической системы РСК.

Диагностикумы

Диагностикумы (антигены) в качестве антигенных препаратов используют для выявления соответствующих антител в реакциях иммунитета. Корпускулярные диагностикумы могут пред­ставлять собой взвесь известных микробов, инактивированных прогреванием, добавлением фор­малина, этанола или известные растворимые антигены, адсорбированные на инертных частицах (латексный, угольный и др. диагностикумы) или клетках (эритроцитарный диагностикум, стафи­лококковый конъюгат для реакции коагглютинации). Диагкостикумы должны обладать высокой активностью (чувствительностью), специфичностью, а корпускулярные также гомогенностью и стабильностью. Эти качества диагностикумов контролируют в тех реакциях, для которых они предназначены.

Примеры описания.

Эритроцитарный Vi-диагностикум - диагностический антигенный препарат, содержащий человеческие эритроциты O(I) группы, на поверхности которых адсорбирован очищенный Vi-антиген брюшнотифозных бактерий; предназначен для выявления РПГА антител к Vi-антигену при отборе лиц, подозрительных на брюшнотифозное носительство, для серодиагностики брюш­ного тифа, оценивают сероконверсии у привитых брюшнотифозными вакцинами.

Диагностикум из сальмонелл тифи «О» - диагностический препарат, содержащий О-антиген Salmonella typhi в виде суспензии инактивированных микробных клеток; предназначен для выявления антител к О-антигену возбудителя брюшного тифа в развёрнутой РА (Видаля), которая ставится: целью серодиагностики брюшного тифа.

Аллергены

Аллергены представляют собой известные антигены микробного растительного или животного происхождения (чаще растворимые предназначенные для выявлении сенсибили­зации к ним организма в аллергических пробах или аллергопробах in vitro. В основе проб мо­жет лежать гиперчувствительность замедленного типа (инфекционная аллергия) или анафилактические реакции немедленного типа (аллергия на гетерогенные сыворотки). Микробные аллер­гены готовят из инактивированных микробных клеток, их экстрактов или продуктов жизнедеятельности.

Пример описания

Антраксин - аллерген (комплекс антигенов) из сибиреязвенной палочки, предназначен­ный для постановки кожно-аллергической пробы с целью выявления инфекционной аллергии (ГЗТ) к Bacillus anthracis; положительная реакция (покраснение и припухлость на месте препа­рата через 24 - 28 ч) наблюдается у больных, переболевших или привитых сибиреязвенной вак­циной (СТИ).

Диагностические бактериофаги

Диагностические бактериофаги различной специфичности, содержат вирулентные фаги, способные лизировать клетки только микробных видов или фаговаров (типовые бактериофаги). Они предназначены для идентификации и/или фаготипирования микробных культур, напри­мер, в ходе диагностики инфекций микробиологическим методом. Получают эти препараты из фаголизатов соответствующих микробных культур. Активность препарата определяется тит­ром, значение которого необходимо знать для приготовления рабочего разведения. Титром пре­парата называют максимальное его разведение, при котором еще наблюдается лизис соответст­вующей микробной культуры.

Пример описания

Типовой стафилококковый бактериофаг тип -77. Титр 10-4- диагностический препарат, содержащий живые вирулентные бактериофаги (фильтрат фаголизата типовой культуры стафи­лококка), способные в опыте фагии лизировать клетки только Staphylococcusaureusфаговара 77; предназначен для фаготипирования.

Иммунотерапия

Иммунотераиия - это применение иммунологических закономерностей для лечения больных. Для этого используются антительные (иммунные сыворотки, гамма-глобулины, плазма) и значи­тельно реже - антигенные (лечебные вакцины, аутовакцины или анатоксины) препараты.

Для лечения острых тяжелых заболеваний, возбудители которых продуцируют экзотоксин, и некоторых других бактериальных инфекции используются препараты, содержащие готовые анти­тела, создающие пассивный искусственный иммунитет. Это антитоксические и антибактериальные сыворотки, иммуноглобулины и плазма.

Антитоксические сыворотки, получаемые путем гипериммунизации животных (лошадей) анатоксином, содержат антитела против экзотоксинов. Активность таких сывороток измеряется в АЕ (антитоксических единицах) или ME (международных единицах). Это минимальное количест­во сыворотки, способное нейтрализовать 100 DLM токсина для животных определенного вида и определенной массы. К таким сывороткам относятся: противостолбнячная, противоботулиническая. противогангренозная, противодифтерийная. Применение антитоксических сывороток обяза­тельно при лечении соответствующих инфекций.

Антимикробные сыворотки, получаемые иммунизацией животных клетками соответствую­щих возбудителей и дозируемые в миллилитрах, содержат антитела против клеточных антигенов возбудителя. Их применяют при лечении сибирской язвы, чумы, стрептококковых, стафилококко­вой, синегнойной инфекций. Их назначение определяется тяжестью течения заболевания и не яв­ляется обязательным.

Иммунотерапия антигенными препаратами имеет целью стимулировать собственные меха­низмы специфической защиты. Она применяется для лечения больных с хроническими, длитель­ными, вялотекущими формами инфекций. Наиболее употребительны убитые лечебные вакцины (гоновакцина, бруцеллезная лечебная, стафилококковая вакцины, вакцина Солко-Уровак - для лечения хронических инфекций мочевых путей, содержит 6 штаммов кишечной палочки, протеев, клебсиелл и фекальных стрептококков.

Особую отдельную группу лечебных вакцин представляют аутовакцины, приготовленные из убитых прогреванием при 70-80°С в течение 1 часа штаммов возбудителей, выделенных от данно­го больного. Аутовакцины имеют определенные преимущества, гак как индуцируют иммунный ответ на антигены конкретного возбудителя.

При иммунотерапии необходимо помнить, что:

  1. противовирусные антительные препараты не используются, так как антитела не действуют на внутриклеточные формы вирусов;

  2. лечение путем введения антитоксических сывороток должно быть начато, как можно раньше, не дожидаясь результатов микробиологического исследования;

  3. антитоксические иммунные сыворотки часто содержат лошадиный белок, и введение та­ких сывороток пациентам допустимо лишь в случае отсутствия в течение 20-30 мин выраженной кожной реакции на лошадиную сыворотку (в/к, в разведении 1:100, в объеме 0,1 мл); в других слу­чаях сыворотку вводят по особой методике или заменяют гомологичным препаратом;

  4. в некоторых случаях возможно одновременное (но не в одном шприце и не в один участок!) введение и антигенных, и антительных препаратов. Например, при первичной хирургической об­работке ран столбнячный анатоксин вводится вместе с противостолбнячным иммуноглобулином, а при множественных укусах животными людей в область головы и шеи параллельно с антирабической вакциной вводится и специфический антирабический иммуноглобулин.

ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ АНТИБИОТИКИ

Химиотерапией называют лечение инфекционных, паразитарных заболеваний или опухолей химиотерапевтическими средствами (химиопрепаратами). Химиотерапевтические препараты (ХТП) - это химические вещества природного или синтетического происхождения, которые в не­изменённом виде или после превращения оказывают подавлявшее действие на паразитов во внут­ренней среде организма без повреждения организма хозяина. Такие вещества должны обладать выраженной этиотропностью (губительным действием, на возбудитель) и минимальной органотропностью /безвредностью для хозяина, а также хорошо растворяться и сохранять активность в организме, быстро всасываться и относительно медленно выводиться из организма, разрушаться в нем, сохранять активность при хранении.

Выделяют следующие основные группы ХТП: антибиотики, сульфаниламиды, нитрофураны, препараты висмута, ртути, мышьяка, антиметаболиты, производные имидазола. В зависимости от вида ХТП, его дозы и чувствительности возбудителя различают действие статическое (задержка роста и размножения) и цидное (полная гибель паразитов). Антимикробным спектром химиоп-репарата называют круг (перечень) чувствительных к нему микробов; спектр может быть узким или широким.

Антибиотики являются наиболее обширной группой ХТП. Антибиотическая промышлен­ность - наиболее развитая отрасль биотехнологии. Всего известно около 6000 антибиотиков, из ко­торых в практике используется 50-100. Антибиотики были открыты в начале XX века при изуче­нии микробного антагонизма - конкурентного взаимодействия двух видов, приносящего обоюдный вред. Вредное влияние может проявляться в виде: прямого паразитизма (бактериофаги), конкурен­ции за питательный субстрат, изменения рН среды, образования простых токсических веществ или специализированных антибиотиков, бактериоцинов (пинов). Бактериоцины - белковые вещества с узким спектром подавляющей активности (как правило, по отношению к микробам того же вида).

Антибиотики - это вещества, в основном, природного происхождения и различной химиче­ской структуры, которые в малых концентрациях вызывают' задержку размножения или гибель микробов и опухолевых клеток.

Химическая природа антибиотиков различна: полипептиды, ациклические, ароматические, сложные гетероциклические соединения. В отличие от дезинфектантов, являющихся общепротоплазматическими ядами, антибиотики действуют избирательно, специфически нарушая процессы жизнедеятельности только у определенных групп микробов (их можно считать продуктами и инст­рументами антагонизма).

По источникам и методам получения различают антибиотики природные, синтетические и полусинтетические.

1. Антибиотики природного происхождения (получают путём биосинтеза)

  1. микробного происхождения (их большинство) - образуются актиномицетами (тетрациклины, аминогликозиды, эритромицин, актиномицины), некоторыми бактериями (полимиксины), гри­бами (пенициллин, гризеофульвин) для их получения штаммы-продуценты выращивают в жидкой питательной среде, после чего клетки удаляют, а препарат в неизменённом виде выделяют из пита­тельной среды и очищают;

  2. растительного происхождения (фитонциды) получают физико-химическими методами из растений - листьев эвкалипта (хлорофиллипт), зверобоя (иманин), из лука и чеснока (летучие эфирные масла);

  3. животного происхождения - из лейкоцитов (интерфероны, лизоцим), эритротроцитов (эритрин), молоки рыб (экмолин); их получают из соответствующих клеток и тканей, а интерферо­ны также путем биосинтеза (генно-инженерный препарат).

II. Синтетические - их полностью получают путём химического синтеза (в основном, как ана­логи природных соединений) - левомицетин, циклосерин и другие.

III. Полусинтетические антибиотики получают на основе природных соединений, как прави­ло, микробного происхождения, у которых путём химического синтеза изменяют структуру (на­пример, радикалы); этот путь наиболее перспективен, поскольку позволяет повысить активность, растворимость антибиотиков, добиться снижения их токсичности. Например, полусинтетические пенициллины (ампициллин, карбенициллин и др.) получены путём химической модификации ядра пенициллина - беталактамного кольца.

Механизмы действия антибиотиков (точки приложения) различны: повреждение отдельных структур или ферментов их биосинтеза, компонентов систем репликации, трансляции и биосинтеза белка. Основными точками приложения являются:

  1. синтез и функции клеточной стенки (циклосерин, беталактамные);

  2. функции цитомембраны (полимиксины, полиеновые - нистатин, леворин);

  3. синтез белка на различных стадиях, например, при действии на малую субъединицу рибо­сом (аминогликозиды - стрептомицин, канамицин, гентамицин и др.), на большую субъединицу рибосом (линкомицин, эритромицин, олеандомицин), при нарушении связи тРНК с рибосомальным комплексом (тетрациклины);

4) синтез нуклеиновых, кислот, например, блок РНК-полимеразы (рифампицин, актиномицины).

Биологическая (антимикробная) активность, антибиотиков выражается в ЕД/мл раствора пре­парата; I ЕД (единица действия) соответствует активности I мкг (10г) химически чистого анти­биотика. Активность нового антибиотика устанавливают в стандартном опыте по задержке роста стандартного штамма микроба в сравнении с эталонным препаратом из данной группы.

Побочное действие антибиотиков может проявляться в отношении микробов и макроорга­низма. В отношении макроорганизма различают следующие виды побочного действия:

  1. прямое токсическое, связанное с физико-химическими и фармакологическими свойствами препарата или продуктов его распада (аминогликозиды действуют на орган слуха, тетрациклины угнетают функции печени, левомицетин угнетает кроветворение и т.п.);

  2. химиотерапевтическое в частности: реакции обострения (вторичная интоксикация продуктами распада микробов под действием антибиотика) и аллергические реакции (будучи аллергена­ми, антибиотики вызывают сыпи, дерматиты или более тяжелые осложнения по типу анафилак­сии);

  1. иммунодепрессивное (угнетение индуктивной фазы иммуногенеза приводит послаблению защитных реакций организма, снижению титра антител, что затрудняет диагностику и способству­ет нестойкости иммунитета);

  2. угнетение аутомикрофлоры, сопровождающееся ослаблением её антагонистической (за­щитной), витаминообразующей и ферментативной функций. Комплекс побочных воздействий ан­тибиотиков нередко приводит к ослаблению организма, развитию дисбактерибзов и суперинфек­ций (стафилококковых, кандидозных и др.).

Побочное действие антибиотиков на микроорганизмы включает:

  1. формирование атипичных штаммов, которые затрудняют диагностику;

  2. образование L-форм. не выявляемых обычными методами и малочувствительных к антимикробным воздействиям, способных к длительной персистенции в организме (происходит хронизация инфекции, возникают рецидивы);

3) формирование и распространение лекарственной устойчивости.
1   ...   5   6   7   8   9   10   11   12   ...   15

перейти в каталог файлов


связь с админом