Главная страница
qrcode

Ение и количественное определение белковых фракций сыворотки крови методом электрофореза на бумаге


Скачать 43.26 Kb.
НазваниеЕние и количественное определение белковых фракций сыворотки крови методом электрофореза на бумаге
Дата18.05.2021
Размер43.26 Kb.
Формат файлаdocx
Имя файлаLaby.docx
ТипДокументы
#46809
Каталог



Разделение и количественное определение белковых

фракций сыворотки крови методом электрофореза на бумаге.

Принцип метода. Электрофорез – это движение заряженных частиц в поле постоянного электрического тока. Скорость перемещения молекул белков в электрическом поле зависит от величин заряда, молекулярной массы, pH, ионной силы раствора.

Белки сыворотки крови помещают на полоску бумаги, смоченную буферным раствором, через которую пропускают постоянный электрический ток. При pH 8,6 белки сыворотки крови заряжаются отрицательно и под воздействием электрического поля перемещаются к аноду.

Сыворотка крови человека содержит различные белки. С помощью электрофореза на бумаге выделяются 5 фракций - альбумины, α
Клинико-диагностическое значение. Многие патологические состояния сопровождаются количественными изменениями соотношения белковых фракций крови – диспротеинемиями. Уменьшение содержания фракции альбуминов характерно для заболеваний печени за счет снижения белок-синтезирующей функции гепатоцитов. Гипоальбуминемия также сопровождает заболевания почек вследствие потери белка с мочой. Увеличение содержания фракций α

Определение активности амилазы ротовой жидкости

по Вольгемуту.

Амилаза - фермент, осуществляющий гидролитическое расщепление полисахаридов до декстринов и мальтозы (химизм реакции см. занятие№6). Конечные продукты действия амилазы не дают цветной реакции с йодом. Наиболее богаты амилазой слюнные и поджелудочная железы.

Принцип метода. Метод основан на том, что слюну разводят в определенной последовательности, после чего приливают одно и тоже количество раствора крахмала и находят наименьшее содержание фермента, которое полностью расщепляет все количество добавленного крахмала. Затем производят перерасчет активности фермента на 1 мл слюны.

Амилазная активность слюны или амилокластичекая сила слюны выражается количеством 0,1% раствора крахмала в мл, которое может расщепляться 1 мл слюны при температуре 380 в течении 30 мин.

В норме амилазная активность слюны составляет 160-320 ед.

Клинико-диагностическое значение имеет определение активности амилазы в крови, куда она попадает из поджелудочной железы (40%) и слюнных желез (60%). Амилазная активность крови по Вольгемуту в норме составляет 25-125 Ед/л. При остром панкреатите в первые сутки заболевания активность амилазы крови возрастает в десятки раз, а затем постепенно возвращается к норме. Амилазная активность крови увеличивается также при паротите (воспалении слюнных желез). Амилаза имеет небольшую молекулярную массу – 45 000, поэтому легко проходит почечный фильтр и попадает в мочу. В связи с меньшей инвазивностью определение амилазной активности мочи (диастазный тест) широко используется в клинике для диагностики состояния поджелудочной железы (см. УИРС).

Расчет. Берется количество слюны в последней пробирке с желтой окраской. Если это четвертая пробирка, то разведение слюны в ней – 160 раз. Составляется пропорция: 1). 160 мл слюны расщепляет 2 мл 0,1% р-ра крахмала; 2) 1 мл слюны расщепляет Х мл 0,1% р-ра крахмала, т.е. амилокластическая активность слюны составляет 320 ед.





Для количественного определения глюкозы в крови используются следующие методы:

I. Редуктометрические – они основаны на свойстве сахаров восстанавливать в щелочной среде соли тяжёлых металлов (титрометрический метод Хагедорна-Йенсена). Недостаток этих методов состоит в том, что они неспецифичны, так как присутствующие в крови рецидивирующие вещества, не являющиеся углеводами, также обладают восстанавливающими свойствами (мочевая кислота, глютатион, креатинин), и полученные результаты включают всю сумму восстанавливающих соединений в крови.

II. Колориметрические – базируются на методологии определения в конечной точке. В зависимости от химической природы аналитической реакции эти методы подразделяются на неферментные и ферментные (энзиматические):

1. Неферментные - основаны на определении степени интенсивности окраски соединений, образующихся при взаимодействии глюкозы с определенным веществом (ортотолуидиновый метод; специфичен и точен).

2. Энзиматические методы основаны на каталитическом действии ферментов (глюкозооксидазы и гексокиназы). Применение энзимных реагентов значительно увеличивает специфичность метода. Процедуры, связанные с использованием глюкозооксидазной и гексокиназной реакций, могут быть автоматизированы, что значительно повышает чувствительность и точность способа определения глюкозы.

Клинико-диагностическое значение определения содержания глюкозы в крови. В норме содержание глюкозы в крови у взрослых составляет 3,9 -5,8 ммоль/л или 0,7-1,0 г/л. Увеличение концентрации глюкозы в крови- гипергликемия - наблюдается после приема пищи, содержащей большое количество сахара (алиментарная гипергликемия), при клинически выраженной форме сахарного диабета, остром панкреатите, травмах и опухолях мозга, повышении гормональной деятельности щитовидной железы, коры и мозгового слоя надпочечников, гипофиза, сильном эмоциональном и психическом возбуждении. Уменьшение уровня глюкозы в крови - гипогликемия наблюдается при передозировке или неоправданном назначении инсулина, некоторых формах гликогенозов, нарушении всасывания углеводов, заболеваниях поджелудочной железы, сопровождающихся гиперсекрецией инсулина (инсулиноме и др.), при недостаточной выработке контринсулярных гормонов, длительном голодании и др.

Определение глюкозы в крови по цветной реакции с орто-толуидином.

Принцип метода. Белки крови осаждаются трихлоруксусной кислотой и отделяются центрифугированием. Центрифугат обрабатывается орто-толуидиновым реактивом.

Глюкоза при нагревании с о-толуидином в кислой среде дает зеленое окрашивание, интенсивность которого прямо пропорциональна концентрации глюкозы в крови и определяется колориметрически на ФЭКе.

Расчет произвести по калибровочному графику или с применением стандартного раствора глюкозы.

Стандартная проба. Стандартную пробу проводят как опытную, но вместо крови используют стандартный раствор глюкозы с концентрацией 5,55 ммоль/л (1,0 г/л), а в случае высокого содержания сахара в крови 16,65 ммоль/л (3,0 г/л) или 27,75 ммоль/л (5,0 г/л).

Сахарная кривая - 4. Количественное определение холестерина в сыворотке крови.

Количественное определение холестерина в сыворотке крови по методу Илька.

Принцип метода. Холестерин, содержащийся в сыворотке крови, обрабатывается реактивом Либермана-Бурхарда (смесь уксусного ангидрида, ледяной уксусной кислоты и концентрированной Н
Клинико-диагностическое значение определения холестерина в сыворотке (плазме) крови. Содержание холестерина в сыворотке крови у человека зависит от возраста. В сыворотке крови здорового взрослого человека содержится 1,5-2,4 г/л (3,63-5,2 ммоль/л) холестерина, у детей - 1,0-1,3 г/л, юношей - 1,3-1,8 г/л, у людей пожилого возраста выше 2,4 г/л. У мужчин старше 60 лет содержание холестерина в сыворотке крови несколько ниже, чем у мужчин 50-60 лет. Это связано с уменьшением продукции и секреции в кровь половых гормонов. Содержание холестерина сыворотке крови женщин детородного возраста ниже, чем у мужчин; после 60 лет половые различия в уровне этого показателя исчезают.

Уровень крови холестерина отражает состояние липидного обмена. Обмен холестерина часто нарушается при различных заболеваниях.

Гиперхолестеринемия (повышение содержания холестерина в крови) отмечается при атеросклерозе, гипертонической болезни, ишемической болезни сердца, дислипопротеинемиях, сахарном диабете, гипотиреозе, подагре, хроническом алкоголизме, заболеваниях печени, почек и др.

Гипохолестеринемия (снижение содержания холестерина в крови) возникает при гипертиреозе, голодании, синдроме мальабсорбции, поражении центральной нервной системы, хронических обструктивных заболеваниях легких, острой стадии воспалительного процесса, дефиците альфа-липопротеинов (болезнь Танжера), онкологических заболеваниях.

Гравиметрический метод определения содержания фибриногена плазмы по Рутбергу.
Принцип метода. Свертывание фибриногена плазмы производят хлоридом кальция. Образовавшийся сгусток фибрина высушивают и взвешивают.

Клиническое значение. Уменьшение концентрации фибриногена отмечается при его врожденной недостаточности (афибриногенемии, дисфибриногенемии, гипофибриногенемии), тяжелых заболеваниях печени, ДВС-синдроме, остром фибринолизе. Увеличение концентрации фибриногена отмечается при инфекционных заболеваниях, острых и хронических воспалительных процессах, раке, тромбозах, тромбоэмболиях, после травм, родов, операций.



6. 0пределснис активности аспартатаминогрансферазы. Колориметрический метод определения активности аспартат- и аланинаминотрансфераз в сыворотке крови.

Определение активности аминотрансфераз в сыворотке крови имеет важное значение для диагностики болезней печени. Для острого гепатита характерно раннее повышение активности аланинаминотрансферазы (АлАТ). При инфаркте миокарда в 95 % случаев в сыворотке крови повышается активность аспартатаминотрансферазы (АсАТ). В сыворотке крови здоровых людей активность АсАТ колеблется в пределах 0,028-0,139 мкмоль/л×сек, активность АлАТ – 0,028-0,196 мкмоль/л×сек.

Принцип метода. В результате переаминирования при участии АсАТ и АлАТ образуются, соответственно, щавелевоуксусная (ЩУК, оксалоацетат) и пировиноградная (ПВК) кислоты.

СООН СООН СООН СООН

| | | |

СН–NH
| | ←→ | |

CH
| | | |

COOH COOH COOH COOH

аспартат α-кетоглутарат оксалоацетат глутамат

СООН СООН СООН СООН

| | | |

СН–NH
| | ←→ | |

CH
| |

COOH COOH

аланин α-кетоглутарат пируват глутамат

Оксалоацетат при декарбоксилировании превращается в пируват. При добавлении кислого 2,4-динитрофенилгидразина ферментативный процесс останавливается и образуется гидразон пировиноградной кислоты. Последний в щелочной среде дает окрашивание, интенсивность которого пропорциональна количеству образовавшейся пировиноградной кислоты.

Расчет активности ферментов производят по калибровочному графику, отражающему зависимость оптической плотности от содержания ПВК.

7. Клинико-диагностическое значение определения щелочной и кислой фосфатазы; изоферментов лактатдегидрогеназы и креатинкиназы.
Клинико-диагностическое значение. Активность щелочной фосфатазы в сыворотке крови возрастает при тяжелом рахите, заболеваниях печени (механическая желтуха, острые гепатиты, циррозы), различных заболеваниях костной системы и снижается при хроническом гломерулонефрите, квашиоркоре, гипотиреозе и цинге. Норма активности щелочной фосфатазы в крови женщины — до 240 Ед/л, мужчины — до 270 Ед/л.
кислой фосфотазы нет

лдг нет

кретинкиназы нет

Количественное определение мочевины в моче по Рашковану.

Принцип метода. Основан на том, что мочевина с гипохлоритом натрия и фенолом образует продукт зеленого окрашивания.

Клинико-диагностическое значение. С мочой у взрослого человека за сутки выделяется 25-30 г мочевины. Колебания в ту или иную сторону обычно зависит от состава и количества пищи (содержание в ней белка). Количество мочевины в моче заметно повышается при лихорадке, уменьшается при некоторых тяжелых заболеваниях печени






Количественное определение креатинина в моче по Яффе.

Принцип метода. Метод основан на способности креатинина в щелочной среде взаимодействовать с пикриновой кислотой с образованием пикрата креатинина оранжево-красного цвета.

Норма: 4,4 – 17,6 моль/сут, или 0,5 – 2 г/сут.

Клинико-диагностическое значение. Содержание креатинина в моче зависит от характера питания, увеличиваясь при употреблении мясной пищи. Повышение его экскреции с мочой наблюдается при усиленной мышечной работе, лихорадочных состояниях, пневмонии авитаминозе Е, тиреотоксикозе и др.; понижение экскреции с мочой наблюдается при мышечной атрофии, лейкемии, амилоидозе почек, голодании.

Принцип определения креатинина методом Поппера

Определение в сыворотке крови проводят после депротеинизирования, в моче — после разведения водой. Определение не совсем специфично, интерферируют вещества с активной метиленовой группой и некоторые восстанавливающие вещества, например глюкоза, ацетон, ацетоуксусная и пировиноградная кислоты.



Количественное определение мочевой кислоты в сыворотке крови по методу Мюллера-Зейферта.

Принцип метода. Мочевая кислота определяется в безбелковых фильтратах сыворотки крови по интенсивности синей окраски, развивающейся при восстановлении фосфорновольфрамого реактива.

Определение мочевой кислоты в сыворотке крови производится с диагностической целью. При подагре, пневмонии, анемии, почечной недостаточности, лечение опухолей рентгенотерапией наблюдается повышение содержания мочевой кислоты. Снижение уровня мочевой кислоты возможно при акромегалии, применении дикумарола, кортизона, салицилатов и инъекций инсулина.

В норме содержание мочевой кислоты в сыворотке крови взрослых составляет у мужчин - 0,25 – 0,47 млмоль/л, у женщин – 0,19-0,43 ммоль/л.

11. Общий анализ мочи: физико-химические свойства, химический состав мочи, определение патологических компонентов мочи.

Клинико-диагностическое значение исследования физико-химических свойств мочи.

1. Суточное количество мочи составляет 1,0-2 л, в среднем 1500 мл. Увеличение суточного диуреза (полиурия) наблюдается при схождении отеков, сахарном и несахарном диабете. 87 Уменьшение суточного диуреза. нарастание отеков вне зависмости от их происхождениях, а также обильное потоотделение, профузные поносы и рвоты. Выраженное снижение диуреза – олигоурия (менее 600 мл в сутки), отсутствие мочи или ее количество менее 50 мл – анурия наблюдаются при тяжелых кровопотерях, острой сердечной или сосудистой недостаточности (шок), при острых нефритах, нефрозах, при переливании несовместимой крови, при тяжелых хронических заболеваниях почек, а также при полной или частичной закупорке мочеточников.

2. Цвет. Красный, или цвет мясных помоев может быть связан с макрогематурией или гемоглобинурией, наличием в моче порфирина, миоглобина, лекарств или их метаболитов. Темно-желтый, иногда с зеленым или зеленовато - бурым оттенком, обусловлен выделением с мочой билирубина при паренхиматозной и механической желтухе. Зеленовато-желтый связан с большим содержанием гноя в моче. Грязно-коричневый или серый обусловлен содержанием гноя при щелочной реакции мочи. Темный, почти черный обусловлен гомогентизиновой кислотой при алкаптонурии, или меланином при меланоме, меланосаркоме, или гемоглобинурией при острой гемолитической анемии. Беловатый связан с наличием в моче большого количества фосфатов, или выделением жира при инвазии паразита Filaria.

3. Прозрачность. Помутнение мочи может быть результатом наличия в ней эритроцитов, лейкоцитов, эпителия, бактерий, жировых капель, выпадения в осадок солей.

4. Плотность. В норме плотность мочи может колебаться от 1,008 до 1,025 г/л. Увеличение плотности >1,030 г/л связано с наличием в моче глюкозы, белка, лекарств или их метаболитов, маннитола или декстрана (при их внутривенном вливании). Постоянное снижение плотности < 1,015 г/л наблюдается при несахарном диабете, хронической почечной недостаточности, остром поражении почечных канальцев.

Определение химических компонентов нормальной мочи.

Качественное определение хлоридов

Качественное обнаружение сульфатов

Обнаружение фосфатов

Обнаружение ионов кальция

Обнаружение аммиака

Обнаружение креатинина (реакция Вейля)

Патологические компоненты мочи.

1.
Качественное определение белка.


Проба кипячением

Проба Геллера

Проба с сульфосалициловой кислотой

Примечание!
2. Качественное определение сахара в моче с помощью реактива Фелинга.
В норме в моче содержится 0,2-0,4 г/л глюкозы и она не обнаруживается обычными реакциями. При диабете и некоторых других заболеваниях, а также после обильного приема с пищей углеводов, эмоционального стресса, при отравлениях эфиром, оксидом, хлороформом, поражения почек он в значительных
В пробирку налить 1 - 2 мл мочи, добавить равный объем реактива Фелинга и осторожно нагреть верхний слой жидкости. При наличии са
3. Качественное обнаружение сахара в моче при помощи индикаторной бумаги «Глюкотест».
«Глюкотест» приготавливается путем пропитки полосок фильтровальной бумаги размером 0,5×5см смесью, содержащей глюкозооксидазу, пе
Бумажку «Глюкотеста» погрузить в исследуемую мочу так, чтобы нанесенная на бумажку желтая полоса была смочена. Немедленно извлечь бумажку, положить смоченным концом на пластмассовую пластинку и через 2 мин сравнить изменившуюся окраску цветной полосы со шкалой, имеющейся в комплекте. Содержание глюкозы в моче определяют по наиболее
4. Количественное определение белка в моче по методу Робертса-Стольникова.
При наличии в моче белка, открытого качественными реакциями, его количество определяют методом Робертса-Стольникова. В основе метода лежит проба Геллера – денатурация белка азотной кислотой. Экспериментально установлено, что при наслаивании на азотную кислоту, растворы, содержащие 0,0033% белка, дают белое колечко в промежутке между второй и третьей минутами после наслаивания. Если колечко появляется непосредственно после наслаивания раствора белка на азотную кислоту, то путем последовательного разведения исследуемого материала достигают такого максимального разведения, при котором появляется кольцо между второй и третьей минутами. Умножая разведение на 0,0033%, получаем процентное содержание белка в моче.

5. Качественное определение кетоновых тел.
В нормальной моче кетоновые тела (ацетон, ацетоуксусная и -гидроксимасляная кислоты) содержатся в небольших количествах (0,02-0,05 г/сут, или 20-50 мг) и обычными качественными реакциями не обнаруживаются. Повышенная экскреция их с мочой (кетонурия) наблюдается при сахарном диабете (до 10-50 г/сут), голодании, инфекционных заболеваниях (туберкулезе и
Проба с нитропруссидом натрия (Легаля) на ацетон

При взаимодействии ацетона с нитропруссидом натрия в щелочной среде появляется оранжево-красное окрашивание. После подкисления концентрированной уксусной кислотой оранжево-красное окрашивание переходит в вишне
В пробирку налить 1 мл мочи и добавить 2 - 3 капли свежеприготовленного раствора нитропруссида натрия и 3 - 4 капли 10% раствора едкого натра. После развития оранжево-красной окраски прилить несколько капель концентрированной уксусной кислоты и отметить изменение цвета раствора в
Проба Либена на ацетон
Проба основана на образовании йодоформа СНI
К 1 мл мочи добавить 3 - 4 капли 10% раствора КОН и по каплям - раствора йода в йодистом калии (раствор Люголя) до появления мути (слабо-желтый кристаллический осадок йодоформа) при наличии ацетона, обладающего специфическим «больничным» запахом.




О




О О

6. Качественная реакция на кровяные пигменты.
Появление в моче форменных элементов крови (гематурия) или кровяных пигментов (гемоглобинурия) относится к патологии и может быть обнаружено с
Проба с бензидином

Проба гваяковой смолой

7. Качественное определение желчных пигментов.

Проба на билирубин с раствором йода (проба Розина)

Проба Гмелина на желчные кислоты

8. Проба Петенкофера на желчные кислоты.


9. Проба Яффе на уробилин.

10. Качественное определение индикана в моче.


12. Количественное определение белка в моче по методу Робертса-Стольникова-Брандберга

Принцип метода: в основе метода лежит проба Геллера – денатурация белка азотной кислотой. при наслаивании на азотную кислоту раствор, содержащий 0,0033 % белка, дает белое колечко в промежутке между второй и третьей минутами после наслаивания. Если колечко появляется непосредственно после наслаивания раствора, содержащего белок, на азотную кислоту, то путем последовательного разведения исследуемого материала достигают такого максимального разведения, при котором появляется кольцо между второй и третьей минутами. Умножая разведение на 0,0033 %, получают процентное содержание белка в моче

Клинико-диагностическое значение
. Моча здоровых людей содержит небольшое количество белка (20-30 мг в суточном количестве мочи), не выявляемые обычными методами исследования. Физиологическая протеинурия встречается при беременности, после физических нагрузок. При ряде заболеваний количество белка в моче увеличивается (протеинурия), поэтому его определение имеет большое клиническое значение. Протеинурия наблюдается при заболеваниях почек, сопровождающихся структурно-функциональными нарушениями гломерулярных мембран (нефриты, нефрозы, преэклампсии, системные заболевания соединительной ткани, нефротическом синдроме, диабетической и гипертензивной нефропатии).



Количественное определение активности каталазы крови методом А.Н. Баха и С.Р. Зубковой.

Принцип метода. Метод основан на титровании избытка перекиси водорода, нерасщепленного каталазой, перманганатом калия в кислой среде.


Активность каталазы выражается каталазным числом, которое представляет собой количество перекиси водорода в миллиграммах, разложенной 1 мл3 крови за 30 минут. Показателем каталазы называют соотношение каталазного числа к количеству миллионов эритроцитов в 1 мкл исследуемой крови.

Показатели нормы. Каталазное число крови у людей колеблется в пределах от 11 до 20 единиц. В клинике чаще используется показатель каталазы, который в норме составляет 2-3×10-6.

Клинико-диагностическое значение. Высокая активность каталазы наблюдается при пернициозной и макроцитарной анемии, а также при введении в организм кофеина, ацетоновых тел, алкоголя. Активность каталазы в крови снижается при ряде заболеваний: раке, анемии, туберкулезе и др



Определение содержания гемоглобина в крови цианметгемоглобиновым методом по Драбкину.

Принцип метода. Гемоглобин окисляют в метгемоглобин (гемиглобин) железосинеродистым калием (красная кровяная соль), образующийся с ацетонциангидрином окрашенный цианметгемоглобин (гемиглобинцианид) определяют колометрически.

У здоровых людей концентрация гемоглобина колеблется в следующих пределах:

- новорожденные – 210 – 225 г/л;

- дети в возрасте 1 месяца – 145 - 165 г/л;

- дети в возрасте 6 месяцев – 115 - 130 г/л;

- дети в возрасте 1 года – 110 - 120 г/л;

- дети в возрасте 14-15 лет – 130 -150г/л;

- взрослые женщины – 120 - 140 г/л, мужчины – 135 - 160г/л.

Клинико-диагностическое значение определения содержания гемоглобина в крови: снижение содержания гемоглобина в крови наблюдается при анемиях различного генеза, при острых и хронических кровотечениях, некоторых инфекционных заболеваниях; повышение – при сгущении крови, при заболеваниях, связанных с увеличением количества эритроцитов (эритремии) и др.



Количественное определение билирубина в сыворотке крови по методу Иендрашека.

Принцип метода. В основе метода Иендрашека лежит реакция билирубина давать розово-фиолетовое окрашивание с диазореактивом Эрлиха. Интенсивность образующейся окраски прямо пропорциональна концентрации билирубина в растворе. Разрушение билирубин-альбуминового комплекса (свободный, или непрямой билирубин) осуществляется кофеиновым реактивом, который одновременно переводит билирубин в растворимое диссоциированное состояние. Интенсивность образующейся окраски измеряется на ФЭКе при зеленом светофильтре (563 нм), а количество билирубина определяется по калибровочному графику.

Нормальное содержание билирубина в крови – 8,5 – 20,5 мкмоль/л; 75% общего билирубина составляет непрямой (свободный), 25% - прямой (связанный) билирубин.

Клинико-диагностическое значение определения содержания билирубина в сыворотке крови: определение общего билирубина и его фракций используется для диагностики и дифференциальной диагностики желтух различной этиологии – гемолитической (надпеченочной), паренхиматозной (гепатоцеллюлярной, печеночной) и обтурационной (механической, подпеченочной). При гемолитической желтухе гипербилирубинемия развивается в основном за счет непрямого (свободного) билирубина. При паренхиматозной желтухе происходит деструкция гепатоцитов и нарушается экскреция прямого билирубина в желчные ходы, он попадает в кровь. Кроме того из-за функциональной несостоятельности гепатоциты не способны эффективно захватывать из крови непрямой билирубин и конъюгировать его. При паренхиматзной желтухе наблюдается гипербилирубинемия смешанного типа. При обтурационной желтухе нарушается эвакуация желчи в двенадцатиперстную кишку, что приводит к повышению в крови прямого, а в более поздние сроки болезни и непрямого билирубина.

Пробы коллоидоустойчивости белков сыворотки крови.

А. Тимоловая проба

Принцип метода. Метод основан на образовании плохо растворимого глобулино-тимололипидного комплекса при взаимодействии сыворотки крови с тимоло-вероналовым буфером.

В норме интенсивность помутнения колеблется в пределах от 0 до 4 условных единиц.

Б. Проба Вельтмана

Принцип метода. Метод основан на нарушении коллоидоустойчивости белков сыворотки крови в присутствии раствора хлористого кальция при нагревании.

В норме коагуляции наступает при добавлении 0,4 - 0,5 мл раствора хлористого кальция.

Клинико-диагностическое. Данная группа проб основана на исследовании изменений коллоидной устойчивости белков сыворотки крови при патологических состояниях, сопровождающихся диспротеинемией (воспалительные заболевания, заболевания печени и почек и др.). Лабильность сывороточных белков, определяемая в первую очередь соотношением крупно- и мелкодисперсных фракций (альбумины/глобулины) и снижением коллоидоустойчивости при действии различных денатурирующих агентов, может быть связана с относительным увеличением глобулинов при уменьшении альбуминов. Большое значение имеет и относительное увеличение γ-глобулинов в глобулиновой фракции.

перейти в каталог файлов


связь с админом